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双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么?

由于蛋白质分子中含有许多与双缩脲结构相似的肽键,在碱性溶液中,双缩脲试剂能与蛋白质反应,形成紫色络合物.因此蛋白质的检测作用的实验原理是:双缩脲试剂与蛋白质呈现紫色反应。

用来检测双缩脲,由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键,因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应。当底物中含有肽键时,试液中的铜与多肽配位,络合物呈紫色。可通过比色法分析浓度,在紫外可见光谱中的波长为540nm。鉴定反应的灵敏度为5-160mg/mL。

双缩脲试剂检测蛋白质原理是什么?

双缩脲试剂检测蛋白质评价:

优点:双缩脲法测定蛋白质的测定范围是1~10mg蛋白质,操作简单、快捷。既适合手工操作,又适合自动化分析,重复性好、线性关系棚码好, 双缩脲试剂可以长期保存( 若贮存瓶中有黑色沉淀出现,则需要重新配制)链燃哪。

缺点:灵敏度差,测定范围窄,样段行品需要量大,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,因此它常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。干扰测定的物质包括有在性质上是氨基酸或肽的缓冲液,如TrIs缓冲液,因为它们产生阳性呈色反应,铜离子也容易被还原,有时出现红色沉淀。

以上内容参考:百度百科-双缩脲试剂